高通量納米壓痕平臺Pavone測試人肺小氣道上皮細胞

特發(fā)性肺纖維化(IPF)是一種慢性呼吸道疾病，其特征是進行性纖維化肺重塑和呼吸衰竭。IPF的啟動和進展與呼吸上皮的損傷和重塑有關，研究表明上皮分泌物及其與成纖維細胞的串擾是IPF疾病病理學的關鍵驅動因素。

來自紐卡斯爾大學(Newcastle University)的James P. Garnett團隊描述了EZH2在TGFβ1驅動的人肺上皮細胞中促纖維化基因表達過程中作為轉錄共激活劑的PRC2非依賴性作用。這需要從PRC2復合物中釋放EZH2，然后是EZH2，POL2和肌動蛋白之間的相互作用。同時，EZH1被招募并形成EZH1-PRC2復合物以維持非靶基因的沉默。這些變化觸發(fā)與間充質細胞的促纖維化串擾，導致ECM重塑和上皮的進一步損傷。該病理網絡的特征為通過抑制非規(guī)范EZH2進行新型治療干預提供了機會。

使用Pavone對人肺小氣道上皮細胞層進行納米壓痕測試。探頭直徑為30 μm，懸臂彈簧常數為0.025 N/m。 對于所有測試點，施加了最多3 nN的力，并以2 µm/s的速度加載，并保持穩(wěn)定性，以確保僅檢測彈性階段。模量使用Hertzian接觸模型根據力-距離曲線的10％來計算。測試區(qū)域均為50 µm x 50 µm。

研究為轉化生長因子(TGFβ1)損傷的上皮啟動與間充質的雙向纖維化級聯(lián)提供了直接證據。揭示了EZH2作為轉錄激活劑的非規(guī)范功能，說明EZH2的酶抑制劑可能無效，除非它們能夠破壞其與轉錄機制的相互作用，同時保持H3K27me3在非靶基因上的占據。由于目前的表觀遺傳抑制劑缺乏以精確方式修改表觀遺傳狀態(tài)的能力以及靶向特定基因組位點的效率，已經確定了一種新的促纖維化機制，可以作為IPF治療中下一代表觀遺傳學療法的潛在治療靶點。

研究論文以"An EZH2-dependent transcriptional complex promotes aberrant epithelial remodelling after injury"為題，發(fā)表在《EMBO reports》雜志上。

doi: 10.15252/embr.202152785